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　　中新网7月27日电据国家疾控局🕒方微信消息🆒为进一步做👩‍❤️‍💋‍👨猴痘防控工🏋️，及时有效🙎‍♂️对猴痘疫情提升猴痘防工作的科学、精准性和效性，切实护人民群众🏕️命安全和身🔣健康，国家控局会同国卫生健康委🦽定并于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出2023年6月以来，我多个省份先-报告多例猴病例，引发’增本土续发情和隐匿传的风险较高要坚持“预为主、防治合、精准防、快速处置-原则，落实⚪早发现、早告、早隔离早治疗”措。　　《猴🥖防控方案》文如下：猴防控方案　🌑猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的👩‍👩‍👧‍👧种人兽共患。2022年9月，我国报告首例猴痘🗒️入病例。2023年6月以来，我国多省份先后报多例猴痘病🤙，引发新增🏃土续发疫情隐匿传播的险较高。为🟨导各地科学准做好猴痘控工作，切维护人民群身体健康，定本方案。、总体要求　坚持“预为主、防治合、精准防🦡、快速处置👨🏾‍🤝‍👨🏻原则，落实早发现、早#️⃣告、早隔离👨早治疗”措。开展医疗🦽构、重点人、入境人员重点场所等渠道监测。🚐强疫情分析风险研判，针对性地开重点人群健➰教育和综合✍️预。落实病隔离治疗、行病学调查📘密切接触者踪管理等措。坚持发现🛑起、控制一，及时阻断情传播。二疾病特征　(一)病原学特征。　　☯️痘病毒属于病毒科正痘毒属，为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中🅾️现该病毒。1970年在刚果民主共和🕋一名疑似天🎇患者的标本首次分离到痘病毒，为例确诊的人猴痘病例。　猴痘病毒为两个进化支：(1)分支I，曾称为中非分支或果盆地分支👥(2)分支II，曾称为西非分支，进🎳步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流区猴痘暴发情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输’性猴痘病例来，各地报中国疾控中病毒病所的株序列均属🕹️IIb分支。　　猴痘病耐干燥和低，在痂皮、🛁壤和衣物、上用品等物表面可生存月。该病毒🏊‍♀️热敏感，加👩🏿‍🤝‍👨🏾至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯毒剂、过氧🚶酸等常用消剂及紫外线有效灭活病，对过氧化️⃣、次氯酸钠戊二醛、邻二甲醛等敏-。　　(二)流行病学特。　　1.传染源。猴痘毒的宿主尚明确，目前为非洲啮齿动物(非洲松鼠、树松鼠冈比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自然宿。传染源包猴痘病例及染的啮齿类物、猴和猿🆚灵长类动物　　2.传播途径。猴痘毒主要经黏🥦和破损皮肤入人体，主💉通过直接接病例的病变肤或黏膜传🏌️‍♂️，亦可通过触被病毒污-的物品、长间近距离吸病例呼吸道沫传播，接感染动物的吸道分泌物🖼️病变渗出物血液及其它液，或被感动物咬伤、伤感染传播🦀　　3.易感人群。人群🧎遍易感。接过天花疫苗猴痘病毒存一定程度的叉保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴疫情主要在👨🏾‍🤝‍👨🏽非和西非地呈地方性流，主要通过触感染动物😓播，所引发人传人疫情播链较短，要为儿童及壮年的散发例及聚集性😋情，通过家或旅行方式尔播散至其国家和地区🤷‍♀️2022年5月以来全球国暴发的疫-,-主要在男男行为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为男性)中经性接触传播，部分病例为📠壮年男性，⏹️过大型聚会及后续在社的MSM扩散，并传播至球多个国家🏇地区。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现状后至皮疹痂自然脱落形成新皮肤📚具有传染性👩‍🔧有调查提示些病例可能✋出现症状前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现发热头痛、背痛-,肌痛和淋巴👨‍❤️‍💋‍👨肿大等。　4.皮疹和黏膜疹：通常热退后出现🍹有些病例可现在全身症之前。皮疹生常经过斑🚖、丘疹、水🧑🏼‍🤝‍🧑🏻、脓疱、结至痂皮脱落个阶段，不形态皮疹可时存在，可有明显痒感疼痛。可累口腔咽喉黏👟、肛门、生✌️器、结膜和膜等。痂皮落后可遗留🐃斑或色素沉🥠甚至瘢痕，痕持续时间🦓长达数年。　5.病程及严重程度。🩺痘病程约2—4周，免疫力低下患者的程可能较长猴痘为自限疾病，大多病例症状会行消失，也重症和死亡🆎生，主要为童、孕妇和疫力低下人。　　2022年以来全球多国猴痘暴🖼️疫情中，大数病例临床现较轻，部🕋病例无全身🔨状，皮疹仅于生殖器、👩‍🦳门直肠黏膜位，死亡病🦩主要为未得治疗的艾滋🈵病毒感染者😬免疫力低下群。2022年以来全球🚐地方性流行🎇病例的病死约为0.1%。三、宣传🦌育与干预　针对重点人、出入境人🔩和一般人群👜不同人群分开展宣传教，有针对性加强不同人的自我防范🍵识和个人防🍨措施，积极合做好防控作。　　(一)重点人群。各地卫生健与疾控部门合相关社会🧘织，充分借艾滋病防治合干预经验🎊服务模式，🤴MSM经常出入的酒吧、🈸所、浴池等点活动场所开展同伴教🦉。借助大众体、MSM社交网站等互网平台，开猴痘防控知宣传教育，高重点人群范意识，减高危行为，导有可疑接史者自觉做自我健康监，增强主动诊意识。　重点人群宣干预要求详附件1《重点人群宣传干指南》。　(二)出入境人员。通过放宣传资料形式，加强入境人员猴防控知识宣教育。提醒👨‍🏭境人员关注的地国家和区猴痘疫情🧚‍♀️息，不接触痘样症状者,,啮齿类、灵类等动物。👩🏾‍🤝‍👨🏻醒来自猴痘👨‍🦳情报告国家地区的人员如在境外有疑接触史，境后21天内应做好自我👩🏽‍🤝‍👨🏿康监测，避与他人发生切接触，一出现发热、疹、淋巴结🤦‍♂️大等猴痘样🐐状，应主动诊并如实报流行病学史　　(三)一般人群。各充分发挥新🛢️体以及广播电视、报纸传统媒体作，开展猴痘🍪控知识宣传育，提高公-科学防范意🌭。四、疫情💓测和报告　(一)监测病例定义。　🦿1.猴痘样症状者。不明📔因急性皮疹(面部或口腔🐱膜、四肢、殖器或会阴🎇肛周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿🤤者。　　2.疑似病例。痘样症状者发病前21天内具备以下🗳️行病学史中任何一项：(1)有猴痘病例报告地区居史；(2)有猴痘确诊例或疑似病🉐接触史；(3)有同性性行为，或性伴🏗️同性性行为；(4)有地方性流行区🕋疑动物接触。　　3.确诊病例。猴样症状者、似病例及密接触者，经验室检测猴病毒核酸阳☔或病毒分离性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监🛶。各级各类疗机构要开猴痘样症状测，尤其是️⃣肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊等重点关注猴🎾样症状者。现猴痘样症者，应主动问流行病学，记录患者住址及联系😢式，采集标送疾控机构行猴痘核酸🛢️测。具备猴病毒检测能及猴痘病毒验活动资质🕟医疗机构也开展检测。,　2.重点人群监测。各🌪️各类医疗机🟣、疾控机构对MSM等重点人群开展💶疗或检测咨↔️服务时，应🏆动询问是否🤜猴痘样症状其可疑接触’。如发现猴👞样症状者和似病例，应时采集标本✌️行猴痘病毒酸检测。　👩🏻‍🤝‍👨🏽3.入境人员监测。海关⌨️到猴痘相关常健康申报检疫发现有痘样症状的🕜境人员，应时进行标本🥂集和核酸检，并发放《诊方便卡》要求其尽快诊；对于核检测阳性者将相关信息🏊‍♂️报辖区疾控构，由相关👬🏼门进一步调️⃣处置。　　4.重点场所污水监测。有件的地区可据当地疫情势，经评估MSM经常出入的酒吧、所、浴池等🤡点活动场所👭🏿展污水监测　　(三)病例报告。　🐟相关医疗机根据临床表、流行病学实验室检测🚜果，及时对者进行诊断🍒　　诊断的似病例和确病例应于24小时内通过国疾病预防制信息系统监测报告管模块进行网直报。如为🧶外输入病例填写输入来🔛国家或地区不具备网络报条件的医卫生机构，在规定时限将传染病报♀️卡信息报告地乡镇卫生、社区卫生🪔务中心或县疾控机构进网络报告，时传真或寄传染病报告🌼至代报单位负责病例网⛹️直报的医疗🌵生机构，要据实验室检🖋️结果、流调展及时对病信息进行复、订正。　🍴各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病关联的确诊例，应当在2小时内通过🥅发公共卫生件报告管理息系统报告🐍事件级别选“未分级”五、疫情处　　(一)病例管理。　各地发现猴🏐疑似病例和诊病例应当时转运至医🐦机构进行隔治疗，如临症状明显好🕍，病变部位🧙‍♀️结痂，可转居家隔离治，直至皮疹’痂自然脱落🥎解除居家隔。对病情较🌙且具备居家离治疗条件确诊病例，医疗机构与😺控机构联合估后，可直采取居家隔治疗。对于行居家隔离疗的确诊病发放《猴痘--例居家隔离疗健康告知》(见附件2)。确诊病例居家隔离治☁️期间，单人间居住，避😫与家人有皮’或黏膜直接触，做好被👩‍🎓染物品的消，非必要不出，确须外时穿长衣长、佩戴医用科口罩，避前往人群聚🍈场所，避免其他人有皮或黏膜直接🚤触；指定医机构安排专🐳负责上门或💸话随访，提健康咨询和疗指导。　🌼(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构到辖区疑似例和确诊病报告后，及📉组织开展流病学调查，找感染来源掌握、追踪.管理密切接🦢者，分析传链及传播特，及时发现在的风险人👬🏻及其范围、征，有针对👩🏿‍🤝‍👩🏾地开展宣传育和综合干🪁。调查过程发挥多部门防联控的协作用，尽可获取全面准的流调信息　　调查内主要包括病基本信息、🙅‍♂️病就诊情况临床表现、归及实验室👨‍⚖️测；发病前21天内与可疑感染来源的触史、接触⭕所及接触方🔡；发病后至离治疗前的👏体活动地点与其有皮肤黏膜直接接者，以及发前4天内与其有性接触者🏎️　　猴痘疫,流行病学调要求详见附🧖3《猴痘疫情流行病学调指南》。　(三)密切接触者的判定🏂管理。　　1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被染物品，或🏄‍♂️染动物及其泌物、渗出等污染物；及职业暴露长时间近距🏰吸入病例呼道飞沫等，🚵‍♀️评估有感染险的人员。　2.密切接触者判定。🥣据流行病学查及暴露风评估结果，控机构负责时对密切接者进行判定　　3.密切接触者管理🧚‍♀️疾控机构或层医疗卫生构指导密切触者做好自🏔️健康监测，🛕康监测期限最后密切接之日起21天。　　密切触者自我健监测期间可常生活与工，需避免与🐠人发生性接等密切接触🥇避免捐献血等；坚持每做好体温测️和症状监测出现猴痘样💳状应及时就并主动报告🤶疑接触史。🍱区疾控机构基层医疗卫📞机构应在密接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话🍏其进行随访提供咨询指，发现异常♎况及时进行置。　　密接触者判定🛫理要求详见件4《猴痘密切接触者判和管理指南。　　(四)消毒与人员护。　　做🎗️病例衣物、巾、床单、具等个人用，以及可能病例分泌物🐺渗出物、体等污染的环-和物体表面消毒。从事👬例诊治护理🆘流行病学调🐐、环境清洁👨‍👩‍👦‍👦毒、标本采🦨和实验室检等工作人员工作期间做个人防护。　消毒与人防护要求详附件5《猴痘消毒技术指♣️》和附件6《猴痘个人防🌴指南》。六实验室检测⛰️　猴痘病毒酸检测首选肤或黏膜病📫部位标本，-同时采集口拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控心病毒病所行复核；本疫情中的首,-或早期确诊例、与早期例有流行病关联的关键🙇‍♂️诊病例、感来源不明的🚙土确诊病例境外输入确👨‍👦‍👦病例阳性标等，荧光定PCR检测Ct值≤32时进行病毒基测序。所有序原始数据组装序列及序样本送检应在获得序🎣48小时内报送中国疾控🏹心病毒病所行汇总、分。以上确诊例应至少采一套标本(包括核酸检测性者的皮肤黏膜病变标👩‍🏫、口咽拭子本以及发病性期和恢复双份血清)送中国疾控中病毒病所。◻️　实验室检具体要求详🍬附件7《猴痘病毒实验室测技术指南🏄‍♂️。七、院内染控制　　疗机构应当💏格做好院内🐺染控制。疑🏋️病例和确诊例应安置在离病房，疑病例单间隔。医务人员行标准预防采取经接触播和经飞沫🏃‍♂️播疾病的隔与预防措施佩戴一次性💡胶手套、KN95/N95及以上级别口罩、防护屏或护目镜一次性隔离等，同时做手卫生。严🧚‍♂️按照《医疗构消毒技术范》对病例体液、血液排泄物、分物等进行规🚵‍♀️处理，做好疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病使用物品等清洁消毒。-,据《医疗废管理条例》医疗卫生机👨‍👨‍👦‍👦医疗废物管办法》做好’疗废物的处和管理。八👗工作要求　🔜(一)加强组织协调。各🧘‍♂️卫生健康、控部门加强❌海关等有关-门的密切协和信息共享及时发现与置猴痘疫情落实猴痘病发现、疫情告、诊疗隔、密切接触追踪管理等作，防止疫扩散和蔓延🔠各地在猴痘情防控过程应注意保护例、密切接🅱️者和重点人等个人隐私　　(二)加强宣传引导各地要及时🦡布辖区猴痘😺情相关信息做好政策解和公众健康示。通过多方式和渠道展猴痘防控识宣传，加重点人群宣教育的针对和实效性。时回应社会切，引导公🖍️科学认识猴。　　(三)加强人员培。各地要加对各级疾控👩🏻‍🤝‍👨🏼构和医疗机专业人员的训。对医务员重点开展痘病例的识🦘与诊断、病发现与报告病例管理等-关知识培训强化诊治意📻。对疾控人🏉重点开展流病学调查、切接触者的定和管理、验室检测、点人群宣传🌺预等相关知培训，提高痘疫情防控应急处置能。　　附件　　1.重点人群宣传干指南　　2.猴痘病例居隔离治疗健告知书　　3.猴痘疫情流行病学调查南　　4.猴痘密切接触判定和管理🍞南　　5.猴痘消毒技术南　　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒实验检测技术指　　附件1　　重点人群🙃传干预指南　2022年5月以来，全球非地方性行区发生的😲痘疫情以男性行为人群(MSM)为主。为充分利我国艾滋病治综合干预务体系，开MSM等重点人群宣传干，防范猴痘⌨️情传播扩散形成常态化滋病与猴痘合防控一体应对机制，🐵定本指南。、实施策略🚲　在现有艾病防治综合预服务体系础上，综合用行为学干方法和手段通过宣传教、促进安全行为、动员测、外展服、同伴教育互联网干预🎾，从个体、🔛体和社会等个层面为目人群提供猴🤡综合干预服😱。二、组织施　　各级⏸️疗机构和疾机构要加强🍵点科室和艾病自愿咨询测门诊工作👫🏻员猴痘知识训，对重点群提供猴痘️⃣控知识宣传检测咨询与🚴‍♀️员、治疗和怀等服务。级疾控机构💓当积极推动⛅地有能力、有良好艾滋防治经验的MSM志愿者或社会组织共参与猴痘防宣传工作，工作过程中意保护重点群个人隐私三、形势分🩹　　各地要👨‍❤️‍💋‍👨强对重点人猴痘疫情、控现状、影因素及出入情况的调查🦎及时分析研猴痘疫情形，为制定本🤶高危行为干🦾工作计划提依据。具体容包括：1.重点人群基、活动形式特点、活动😪所、出入境时间及地区；2.猴痘知识、态度和🕋危行为；3.猴痘疫情水🐺及其影响因；4.猴痘防治政策及专机构已开展👨🏾‍🤝‍👨🏻工作；5.包括志愿者在的有关组织🥫个人已开展🧑🏿‍🤝‍🧑🏽干预活动；6.影响猴痘防治工作的困和问题。四宣传干预　(一)宣传教育。各级疾机构或健康♋育专业机构供技术支持🎠社会组织参，共同研究💠定适合当地📣点的猴痘预宣传材料，强警示宣传育。通过大媒体、MSM网站和以移终端为载体交友软件等🧚台，宣传国、国内及本猴痘疫情信和防控知识提高重点人猴痘防范意🦂。　　(二)同伴教育。🙅‍♂️级疾控机构加强同伴教员挑选、招🐢和培训，组和支持同伴💀传活动，增人群猴痘风防范意识，动主动检测定期组织同教育员工作会，了解猴🦃干预工作存’的困难和问，有针对性给予帮助和持。　　(三)外展服务。各级疾控机干预工作人定期到重点群活动场所💻展猴痘宣传咨询、发放🙇‍♀️传材料等外服务活动，高重点人群痘防范意识🏋️‍♂️知识水平，💃动重点人群强自我健康,理，主动寻-检测咨询服。　　(四)检测咨询。级疾控机构过互联网、伴教育、外活动等多种式动员有猴🎁样症状或可接触史的重人群进行猴🧼检测。各级📯类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊发猴痘样症状，应主动询💉其流行病学及性接触史🏤记录患者现址及联系方🟥，采集标本🚪疾控机构进猴痘核酸检，具备猴痘测能力及猴🎖️病毒实验活资质的医疗构也可开展🤝测。对于已立互联网+HIV检测平台的地区，可加猴痘检测🐢容，实现互网在线检测约和结果查。五、重点所干预　　🦙点活动场所🧹括实体和虚两类场所，体场所包括吧、会所、池等经营性-所，虚拟场🙀包括移动互网和社交媒。　　(一)实体场所干。　　各级📩控机构负责织干预工作🤿员在当地MSM经常出入的酒吧、会所浴池等活动所，开展猴预防干预宣，主要包括🌟　　1.在MSM经常出入的酒吧、会、浴池等实场所，张贴😗目的健康教宣传图片，🚚置健康教育🍍料公告栏；　2.强化个人健康责任👃识，开展猴健康咨询，动开展自我险评估；　🧐3.提供转介服务信息，🐖知明确的诊流程以及相检测、医疗构名称、联人等信息。📣　各地要加🦽对猴痘确诊💮例发病前21天内活动过💁场所以及污监测阳性场,的干预宣传重视目标人🏧的个人隐私护，加强对会组织同伴育员猴痘防知识培训，立规范的行🌲干预流程，🎿高自我防护⌨️能。　　(二)虚拟场所干预。　　各疾控机构负组织指导当有序开展猴🌦️线上宣传，,相关网站、交媒体平台🐨时发布和更👨‍🏭猴痘宣传教内容，形成👩🏽‍🤝‍👨🏾向重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预务体系。　⛹️各级疾控机👃支持社会组或同伴教育⛓️利用网站、箱或社交媒平台，组织展在线咨询交流。及时🆚答网友提出🎦各种猴痘相问题。针对同时期猴痘📸播特点，定或不定期组专家、专业员、同伴教员利用互联和社交媒体台进行在线教。各级疾🥗机构要定期导更新相关,,,业信息，确宣传内容科、有效。　🖕附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病调查指南　为指导各地🧦控机构规范展猴痘疑似例、确诊病和聚集性疫的流行病学🌭查，及时掌🦿病例暴露史接触史等流病学相关信，落实密切触者的追踪定，防止疫传播扩散，定本指南。、调查目的🏺　(一)查找感染来源，握、追踪和理密切接触📴。　　(二)分析传播链传播特征。　(三)及时发现潜在的险人群及其征、范围，针对性地开宣传教育和🧝‍♂️合干预。二调查对象　🎯疑似病例、🧝诊病例和聚性疫情。三🔒调查方法和容　　通过阅资料，询病例、诊治生、家属和情人等进行🥽行病学调查如病例的病允许，调查应先调查病♍本人，再对诊治医生、属和知情者🏑行调查。　🆙开展个案调时，要认真详细了解和👨‍👩‍👧‍👦录病例基本息、发病就😅情况、临床🍁现、转归及验室检测信；发病前21天内与可疑染来源的接史、接触场及接触方式发病后至隔治疗前的具🚜活动地点、🐤其有皮肤或膜直接接触️⃣，以及发病🤾‍♀️4天内与其有性接触者。　(一)基本情况。如姓🥦、性别、年、住址、国、联系方式。　　(二)发病就诊情。临床表现实验室检测发病就诊经和病情变化转归。　　(三)感染来源调查。对病㊙️发病前21天内的暴露史🚢展调查，包境内外猴痘例报告地区👨‍🦰行史或居住，对可疑的染来源要详询问接触时-、方式、频、地点及接时采取的防措施等，特🌖是性接触史😆调查时，若现调查表中列入，但具重要流行病意义的内容应进行详细问和记录。🐡　(四)密切接触者调查判定。对病🧞传染期的活’情况和人群💳触情况进行踪和排查后判定其密切触者。密切触者判定和👩‍🎓理按照《猴密切接触者🙍‍♀️定和管理指》(附件4)执行。　　见附件3-1《猴痘病例案调查表》四、组织与施　　按照属地化管理原则，由病现住址所在县(市、区)级疾控部门织辖区疾控构开展猴痘例的流行病🧑调查，就诊疗机构提供疗信息。调单位应根据🚆查计划和调目的，确定查人员组成🏋️‍♂️职责分工，🚊时开展病例行病学个案📆查。调查过中发挥多部联防联控的同作用，尽能获取全面确的流调信。调查期间调查人员要好个人防护🗡️五、信息的报与分析　🏛️疾控机构完-调查后，应😞好病例分析结，及时将行病学个案查表、调查告等资料逐报送上级疾机构，并做调查资料的🍑管和存档。例流调信息按有关规定💼严格做好信安全和个人私信息保护　　附件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘密切触者判定和理指南　　指导各地做猴痘密切接♑者判定和管🎡，有效控制🚐痘疫情的传，制定本指。一、密切触者判定标　　密切接-者是指直接🍺触病例的病部位及其被💢染物品，或染动物及其泌物、渗出等污染物的员；以及职暴露或长时近距离吸入🚪例呼吸道飞等，经评估🏌️‍♀️感染风险的员。具体情🔅包括：　　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤黏膜直接接的人员，接方式包括性触、抚摸、㊗️抱和亲吻等🧑🏼‍🤝‍🧑🏼　　2.与有皮疹症状的似病例或确🦍病例共用衣、被褥、餐🕘等物品的人🤨；　　3.医疗诊疗、采🚻或实验室检等操作过程可能暴露于毒，经评估感染风险的疗卫生工作,-员；　　4.与疑似病例确诊病例发前4天内有性接触，并经🌃行病学调查业人员评估🦝感染风险的员，亦可判为密切接触；　　5.在狭小密闭空与疑似病例确诊病例长间近距离接👩🏾‍🤝‍👨🏿(如长时间共处同一封闭间)，经流行病学调查专人员评估有💯染风险的人🤦，亦可判定密切接触者　　6.接触感染猴痘病的动物及其😪泌物、渗出等污染物，未采取有效🗯️人防护的人；　　7.其他可能存在👨‍👧毒暴露风险人员。二、切接触者管　　1.管理期限与方式病例发现地控机构或密✌️接触者所在疾控机构应追踪到密切触者当天及🏄开展猴痘病核酸检测，知并指导密接触者做好我健康监测健康监测期♏为自最后密接触之日算👩‍⚕️21天。自我健康监测期可正常生活工作，需避-与他人发生,-接触等密切触，避免捐血液等。　2.知情告知。实施健康测时，疾控👓构或基层医卫生机构应🙆‍♀️头告知健康🧇测的缘由、限、注意事和疾病相关识，以及负随访疾控机🧼或基层医疗生机构联系和联系方式并发放《猴密切接触者🥴康告知书》　　3.定期随访。疾控构或基层医🦕卫生机构应第7、14、21天电话或上门主动询密切接触者👭🏽我健康监测况，提供咨指导建议。现异常情况及时调查处。　　4.自我健康监测坚持每天做体温测量和状监测，主症状包括发(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结大等。密切触者一旦出相关症状应时前往医疗构就诊或与访联系人取联系，接受痘病毒核酸测。　　附：4-1.猴痘密切接触🎈健康告知书　附件5　　猴痘消毒技指南　　为一步规范猴🧯疫情相关的毒工作，落科学消毒、准消毒，减猴痘病毒对众健康造成🚕危害，制定指南。一、源地消毒　(一)适用范围。　　适于出现猴痘例后，对其能污染的场和物品进行随时消毒和末消毒。　📱(二)消毒原则。　　1.范围和对象定。　　根流行病学调结果，确定场消毒的范和对象。对例在住院、👨‍👨‍👧运期间可能染的环境和品，进行随消毒。对病👩🏼‍🤝‍👨🏽居住或活动的场所，如住场所、工场所、学习🍖所、诊疗场🎑、转运工具及其他可能到污染的场，在其离开🕜(如住院、转院、出院、亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒尽量选择一性诊疗用品非一次性诊🌲用品应首选力蒸汽灭菌📮不耐热物品选择化学消剂或低温灭设备进行消或灭菌。　(2)手消毒。建议使用消毒剂揉搓⏪手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒👩‍👦‍👦。　　(3)环境和物体面消毒。可择含氯消毒🔯、二氧化氯过氧乙酸、氧化氢等消☣️剂擦拭、喷🐡或浸泡消毒　　(4)衣物、床单等织品消毒。选择热力消、含氯消毒或季铵盐类🎦毒剂浸泡等毒方式。　(三)常见污染对象的消◼️方法。　　1.手消毒。　　可选用速手消毒剂，--直接选用75%乙醇进行擦拭消毒；醇🉑过敏者，可择季铵盐类有效的非醇手消毒剂。肉眼可见污物时，应先用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六🪒洗手法清洗-手，然后按🍕述方法消毒🦓　　2.皮肤、黏膜。　🤹‍♂️皮肤被污染污染时，应即清除污染，再用一次吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢🚚毒剂擦拭消3分钟以上，使用清水清干净；粘膜用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　3.床单、毛巾、衣服等织品。　　例使用的床🚥、毛巾、衣等纺织品，🐵肉眼可见污🔸物时，若需📡复使用，可😂流通蒸汽或📧沸消毒30分钟；或用有🧞‍♂️氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消剂浸泡30分钟后，按照规清洗；或其他有效的🌫️毒方法。不湿的衣物可🔄用环氧乙烷干热方法进消毒处理。　有分泌物,渗出液、排物、血液、🎺液等污染物，建议按医🍘废物集中处。　　4.餐(饮)具。　　病例所使♏的碗、盘、、杯等餐(饮)具清除食物残渣后，煮消毒30分钟，或使用有氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再清水洗净。👳‍♀️　5.污染物。　　对病分泌物、渗液、排泄物🔋血液、体液少量污染物用一次性吸😮材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒👩🏿‍🤝‍👨🏽(或能达到高水平消毒的毒湿巾/干巾)小心移除。　　对病例👩‍🔧泌物、渗出、排泄物、液、体液等量污染物应♿用含吸水成🐻的消毒粉或白粉完全覆🛡️，或用一次吸水材料完覆盖后用足的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水材🐂上，作用30分钟以上(或能达到高水,-消毒的消毒巾)，小心清除干净。清过程中避免触污染物，理的污染物医疗废物集处置。　　例的分泌物应有专门容收集，用有氯20000mg/L的含氯消毒剂，物、药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物🍏，应对污染环境和物体🐣面进行消毒盛放污染物容器可用有💳氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液🍁泡消毒30分钟，然后清干净。　　6.地面、墙壁。　　有肉🚲可见污染物🍭，应先完全除污染物再🔂毒。无肉眼见污染物时可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂-拭或喷洒消；不耐腐蚀地面和墙壁也可用2000mg/L的季铵盐类消’剂喷洒或擦；消毒作用间不少于30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设设备表面以床围栏、床柜、家具、⭕把手、卫生-具和家居用等有肉眼可🕟污染物时，🤺先完全清除染物再消毒🥫无肉眼可见-,染物时，用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂，不耐蚀的物体表也可用2000mg/L的季铵盐类消剂进行喷洒擦拭或浸泡毒，作用30分钟后清水拭干净。　8.污水和粪便。　　在入市政排水👩‍🦽网前需进行毒处理，消后污水应当合《医疗机水污染物排标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　病例生活圾按医疗废处理。　　10.医疗废物。　　医疗物的处置应😒循《医疗废管理条例》😖《医疗卫生🧛构医疗废物理办法》的🦚求，规范使双层黄色医废物收集袋™️装后，按常👩‍⚕️流程进行处-。　　11.室内空气。　如经科学🛠️估，需对室空气进行消，则在无人况下，可选🌒5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。-可采用经验🎻安全有效的🥖他消毒方法二、注意事🚗　　现场消↩️应确保所用🟪毒产品合法效，所选消方法科学可。现场消毒-，根据现场况和相关标要求，选择🍌格有效的个防护装备，做好个人防🌃的前提下，格按照工作🛬案实施消毒　　消毒实🌬️单位应具备👨‍🔧场消毒能力操作人员应🦷过消毒专业训，掌握消🐈和个人防护,本知识，熟’消毒器械的用和消毒剂,配制等。　🎶每次开展消🎏工作时均应🦪好消毒记录包括消毒对🐨、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同，相关部门单位应做好毒工作的监📶管理和评价🦿　　附件6　　猴痘个人护指南　　加强公众、情处置相关作人员和医人员的个人护，避免猴病毒暴露感⬆️，制定本指。一、居家离治疗的病等相关人员　(一)适用范围。　　👨‍👧‍👧用于居家隔治疗的病例(疑似病例和诊病例)、照护人员或共居住者的个🖐️防护。　　(二)居家隔离区域要求。　1.应选择有自然通风独立卫生间房间作为隔区域。　　2.应配备专用的餐具，床🌤️、毛巾等床用品，消毒和口罩等个🎻防护用品，视和平板电等电子设备　　3.卫生间宜配备专的洗衣机，漏应有水封　　(三)病例管理要求　　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好温测量和症监测，避免他人共用个🤼物品。　　3.避免与他人发生性接触-避免与免疫👬🏽低下人员、👳‍♂️童、老人、🏊‍♀️妇及其他人的直接接触避免与宠物动物接触，🍽️免捐献血液。　　4.外出就诊时，🏐佩戴医用外口罩，着长长裤，确保住所有损伤🔇肤，避免与🤽‍♀️人密切接触😌避免乘坐公⛓️交通工具。*️⃣　(四)照护人员要求。　1.应每天做好体温测和症状监测　　2.应尽量避免进入🥔离区域。如进入隔离区，应佩戴医🌘外科口罩和次性手套，病例保持至,1米的距离。在离开隔离域之后，应🦮强手卫生，对脱下的口和手套进行🛡️毒处理后废🛏️。　　3.在拿放和清洗家隔离治疗📗例的床单、💘服和处理垃🤚的过程中，避免抖动。🧏‍♂️湿拖布拖地避免干扫。湿抹布清洁✡️居用品表面🔠地毯应用蒸清洗，避免用吸尘器。🛵　4.应将居家隔离治疗例的餐具、🧑🏻‍🤝‍🧑🏻单、毛巾和物单独洗涤消毒，可选热力消毒、氯消毒剂或铵盐类消毒浸泡等消毒🧍‍♀️式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同住者出现任🎙️症状或不适,,现，应当及前往指定医🏖️机构就诊并动报告可疑触史。　　2.对其接触的物品、活动☘️区域等结合险评估结果行消毒处理二、疫情处相关工作人　　(一)适用范围。　适用于猴痘情期间流行学调查、环清洁消毒人的个人防护　　(二)流行病学调查员防护要求🤥　　1.个人防护装备。次性乳胶手、医用外科👰罩、一次性👸离衣等。　2.个人防护要求。规范👑戴口罩，加手卫生，与😔调查人员保至少1米的距离。　　3.废物管理。查结束后，♑弃的个人防装备暂存、理和处置应照《医疗废管理条例》👝行。　　4.应急处置。在调查过程出现口罩脱,,、直接接触病例皮肤或♻️泌物等情况要结合被调人员的临床断结果、空的密闭性、-触的时间和👩🏼‍🤝‍👩🏻离等进行风👶评估，结合险评估结果🤼采取相应的🔽置措施。　(三)环境清洁消毒人员护要求。　1.个人防护装备。一次乳胶手套、🏃用外科口罩一次性隔离、防水靴套📕。　　2.个人防护要求⚕️规范佩戴口，加强手卫🐪，尽量减少被消毒物品直接接触。　3.废物管理。清洁消结束后，废🎴的个人防护备暂存、处💽和处置应按《医疗废物理条例》执😌。　　4.应急处置。如清洁消毒过☕中出现口罩落、皮肤损或直接接触泄物、血液🟢情况，要结被清洁消毒品的类型、触的时间和间的密闭性进行风险评，结合风险估结果，采相应的处置施。三、医人员的个人护　　(一)适用范围。🥰　适用于猴疫情期间医人员及其工🤸‍♀️环境的防护　　(二)基本要求。　1.个人防护装备要求。务人员执行准预防，采经接触传播经飞沫传播👯‍♂️病的隔离与防措施，佩🚡一次性乳胶👨‍👦‍👦套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏🏥护目镜、一性隔离衣等　　2.环境防护要求。🏽院环境的清🎟️消毒应符合🧐件5的要求。应避免干除🍙、清扫或吸等活动。首湿式清洁方。　　3.废物管理。个防护装备、♏例敷料等暂🥻、处理和处应按照《医废物管理条🥋》执行。　附件7　　猴痘病毒实验检测技术指　　为指导级疾控部门其他相关机⛔规范开展猴病毒实验室测工作，快、准确识别痘确诊病例️⃣制定本指南本指南主要🎬绍标本采集及猴痘病毒酸荧光定量PCR检测方法、生物安全🥾求等内容。、检测对象　(一)猴痘确诊病例和🤔似病例；　(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘🏺毒的动物；　(四)环境或其它生物🅿️料。二、技人员基本要　　(一)采样人员。从-,猴痘病毒核检测标本采的技术人员🏩当经过生物全培训，培合格后方可事采样工作采样人员应悉采集标本👫🏿类和采集方，熟练掌握🦃本采集操作程及注意事，做好标本息记录，确👨‍👧标本质量符要求、标本相关信息可溯。　　1.采样人员个🌈防护装备要🧸：KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏或目镜、一次隔离衣、一◼️性乳胶手套(尽可能戴两)、靴套；如果接触了病血液、体液分泌物或排物，应及时👩🏿‍🤝‍👨🏻换手套。污采样人员可🥟据实际工作要，适当降🧑🏼‍🤝‍🧑🏼防护级别。　2.住院病例的标本由-在医院医护员采集，根🃏实验室检测作的需要，结合病程多🍪采样。　　3.密切接触者标本由当地控机构或医机构专业人📙采集。　　4.感染或疑似感染猴痘病的动物由当✖️疾控机构协动物疫控部🌴专业采样人负责采集。🍄　5.环境或其它生物材🎖️标本由相关业采样人员-责采集。　(二)检测人员。实验室🏭测技术人员具备相关专大专以上学或具有中级以上专业技👐资格，并有2年以上实验,,,工作经历，受过核酸检💓相关培训，训合格后方🧛‍♂️从事检测工。实验室配🧑🏿‍🤝‍🧑🏻的工作人员量应与所开检测项目及本量相适宜确保能够及、熟练、准地开展实验🥩检测和报告果。三、标采集、保存运输　　(一)标本采集种类。　　1.首选标本是-肤(黏膜)病变部位标本⏸️包括病变表🦧拭子、痘疱🌔或痘疱渗出拭子、痘痂痘痂拭子等🚭　　2.呼吸道标本，如咽拭子，可于病例急性检测，也是切接触者检最常用标本🌸　　3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本进行酸检测。　4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检。　　5.直肠拭子、尿、精液、唾等其它标本用于研究，据工作需要集。　　6.污水或其它😇境生物材料本根据实际♑作需要进行集。　　(二)标本采集要求。　　采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无聚酯纤维、龙或类似材⚕️拭子，避免👕用棉拭子。集疑似病例标本前应避使用75%乙醇等消毒剂洁病变部位⭕每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能集两个以上子，每个病🚾应同时采集🦐体不同部位外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘🐶或分泌物等同拭子标本放置于不同采样管中。行病毒分离应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采液保存。根💏实验室活动质确定使用🟢灭活型或灭型采样液采标本。　　(三)标本采集方法。　　1.斑疹、丘疹、水疱或脓🕖等皮肤(黏膜)病变部位标本：一手紧采样拭子尾，手与拭子部保持一寸🚿上距离。采🔖时适当用力🤖压拭子，在🦩损表面来回拭至少2-3次，然后以🚼子另一面再复擦拭2-3次。如果在拭过程中痘破裂，要确采集到痘疱🐧。采样后将子放置于无🥄采样管中(可含病毒采样或不含液体)，折断拭子，去除拭子部，盖上管，以消毒纸擦拭消毒采-管，以封口密封管盖后采样管保存送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样应确保实验可检测此类🚹本。使用无🐮镊子或其他头器械夹取🔷部痘痂或面😯至少4mm×4mm大小的痂皮，放置干燥、无菌🏪采样管中，🛣️样完成后以💤可贴覆盖患😢。　　3.口咽拭子标本被采集人员👄部微仰，嘴大，露出两〽️扁桃体，将子越过舌根🥚在被采集者侧扁桃体稍用力来回擦至少3次，然后再在咽后👨‍🏭上下擦拭至3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中置于不含液(干拭子)的无菌管中，🐃部弃去，旋管盖。　　4.血液标本：尽量采集急⚒️期(发病7天内)的血液标本，建议使🥳含EDTA抗凝剂的真空血管采集5mL全血，可利用全血进行测，或室温🧝‍♀️置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血于无菌管中👨‍🦲行检测。　5.血清标本：用真空负采血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无螺口塑料管。第一份血🤴应尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应✈️发病后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清无菌螺口塑管中，用于🥭痘抗体检测　　6.其他标本：依据计需求规范集。　　(四)标本保存。　　标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测🤞可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存；1周内无法检测的🐼本，短期可于-20℃环境中保存，🧹期应置于-70℃或以下环境中保存。血分离血浆🧇冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存应设立专库专柜单独保🎃标本，避免⏰复冻融标本　　猴痘病及其相关标应由专人管，准确记录毒及标本的源、编号、量等信息，体要求可参《病原微生菌(毒)种保藏数据描述🧯则》(T/CPMA011-2020)。应采取有🎋措施确保病及标本安全严防发生误、恶意使用被盗、被抢丢失、泄露事件。　　(五)标本送检。　　标本集后应尽快👛低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室如需长途运标本，应采干冰冷冻运,-方式进行保。　　1.送检标本：病标本先由省及以下疾控😞构进行初步测，各省首猴痘阳性标应送中国疾中心病毒病♥️复核。每个性病例至少集一套标本(皮肤或黏膜变部位标本口咽拭子标⚓及急性期、👨‍👧‍👦复期双份血🥌标本)送中国疾控中心病🥶病所检测。省级疾控机根据实际情😤制定省内样送检、复核-程。　　2.病原体及标😙运输：　　(1)国内运输。猴痘病毒🧝‍♀️其他潜在感性生物材料🔨运输包装分🙎‍♂️属于A类，对应的联合国号为UN2814，包装符合国际民航织文件Doc9284《危险品航空安运输技术细》的PI602分类包装要求，通过其交通工具运的可参照以标准包装。痘病毒或其👭🏼潜在感染性🍖料运输应按《可感染人的高致病性🏬原微生物菌(毒)种或样本运输管理规🤔》(原卫生部令第45号)办理《准运书》。污水环境标本暂普通生物样运输标准执。　　(2)国际运输。痘毒株或样在国际间运的，应规范装，按照《入境特殊物卫生检疫管规定》办理关手续，并足相关国家国际相关要。四、猴痘毒核酸检测求及流程　(一)实验室资质要求。⛷️　开展猴痘👩‍👩‍👦毒核酸检测实验室，应符合《病原🎓生物实验室物安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因👳‍♀️增检验实验管理办法》(卫办医政发2010〕194号)有关规定，具备📆区的市级卫健康部门备的生物安全🐼级(BSL-2)实验室及以上实验室-件，并备案痘病毒相关验活动。独设置的医学验实验室还符合《医学验实验室基标准(试行)》《医学检👹实验室管理⭐范(试行)》等要求。　🧵开展猴痘病📵分离、培养中和等涉及🗡️毒扩增、使等实验操作实验室应具国家卫生健委批准的生👺安全三级(BSL-3)实验室及以上验室条件，🏜️获得猴痘病实验活动批🛸。分离的猴👭🏽病毒应送国🥽病原微生物藏中心/国家病原微生物源库病毒分保藏。　　(二)实验室生物安全要求　　根据2006年公布实施的《人间染的病原微物名录》(简称《名录》)，猴痘病毒物危害分类第一类，是种高致病性毒。按照《录》要求，痘病毒的分、培养等涉病毒扩增及用的实验操👨‍👧‍👦需在BSL-3及以上实验室的生物安柜内进行；灭活采样液集的猴痘病样本的灭活BSL-3实验室进行；🚘本灭活后猴病毒DNA提取、检测可BSL-2及以上实验室PCR检测的专门区域或间进行。如名录》更新️⃣开展猴痘病操作的实验生物安全要应按最新《录》执行。水样本的灭参照普通生样本。　　(三)实验室分区要求。　原则上开展痘病毒核酸👩‍❤️‍💋‍👨测的实验室当设置以下域：试剂储和准备区、🌟本制备区、增和产物分-,区。三个区♀️在物理空间🏊应完全相互立，空气应向流通。各🧍‍♂️功能分别是　　1.试剂储存和准备：贮存试剂🤤制备、试剂分装和扩增应混合液的👕备，以及离💁管、吸头等耗品的贮存准备。　　2.标本制备区：转运桶开、标本灭活核酸提取及入至扩增反管等。　　3.扩增和产物分析区：核扩增和产物析。　　根使用仪器的◀️能，区域可📰当合并。如⬛用标本处理核酸提取及增检测为一的自动化分仪，标本制区、扩增和👟物分析区可♿并。　　(四)主要仪器设备。　　实室应当配备🌠开展检验项相适宜的仪设备，包括💠二级生物安👆柜、高速台离心机、干,,恒温器、荧定量PCR仪、计时器、液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸测流程。　实验室接到本后，按照准操作程序行试剂准备标本前处理核酸提取、🧤酸扩增、结分析及报告实验室应当立可疑标本阳性标本复流程。　　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括变表面拭子-痘疱液或痘渗出液拭子痘痂或痘痂🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿子、咽拭子🌄全血或血浆标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　试剂：DNA聚合酶或预的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病检测引物、针：　　③🆖性对照：涵⚖️检测靶标序-的质粒。　(4)灭菌去离子水、无🌋乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部🕝物体表面常消毒，开启有效期为1周。　　②含消毒液：现现配，含有👮氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒含有效氯5000mg/L的消毒液用🧘‍♂️感染性材料🐧洒时的应急理。　　(6)耗材：包括带滤芯的吸、螺旋口的心管、非螺口的离心管含锆珠的粉管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明👩🏿‍🤝‍👩🏼。　　(7)BSL-2个人防护用品包括KN95/N95口罩及以上级别🤦口罩、一次隔离衣、防🌠眼罩或面屏一次性帽子🦓鞋套、靴套手套。　　2.实验前的标本接收。　(1)核对被检标本编号-姓名、性别🕦年龄及检测目；　　(2)待检标本的状态如有异，需注明；🧪　(3)待检标本长期存在-70℃，短期存放可-20℃，避免反复冻融👨‍👦‍👦　　3.核酸检测操作步及注意事项🗨️　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法DNA提取试剂盒相应说书进行操作🎠具体如下：　①提取试准备：第一开启试剂盒在使用前先漂洗液中加无水乙醇，入体积参照上标签。所🛫试剂在使用应平衡至室🥱；所有离心骤应在室温🚶‍♀️进行。　　处理样本：🏡　A.痘疱液：干拭子标👆需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足🦇体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体--含PS的PBS，研磨或匀浆处理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子从采样液中👩🏼‍🤝‍👨🏽200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀📎取200μL；　　D.全血或血清：接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，液会变清亮若样本为病皮疹或其它织时，加入白酶K混匀后，在56℃放置，直至组🍞溶解，再进下一步骤。,,　④加入200μL裂解缓冲液，充分,-匀，70℃放置10分钟，或至溶液变亮，简短离👩🏽‍🤝‍👨🏿以去除管盖壁水珠。　👽需注意：加😰裂解缓冲液可能会出现👩‍❤️‍👩色絮状沉淀在70℃放置后会消失。溶液未变清，说明细胞,解不彻底，能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　加200μL无水乙醇，分混匀，此可能会出现状沉淀，简离心以去除🧕盖内壁水珠　　⑥将上步骤所得溶🧜‍♂️和絮状沉淀加至吸附柱(吸附柱放入废液收集管)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑦加500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否加入无水乙)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将附柱放回废收集管中，-大转速13000rpm离心1分钟，尽量去除漂洗🙄。　　⑩将附柱转入一干净的离心中(需自行准备，试剂盒未提供)，加入50μL洗脱缓冲液或菌去离子水室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，好标记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。🐜　(2)核酸检测：实时🎸光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体系的👩🏾‍🤝‍👩🏽备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；📼有样本，包对照，应设孔。　　②样：每根反-管中加入核或对照各5uL，盖紧管盖或封好透明，置于荧光量PCR检测仪上。　　扩增条件设👨‍🦲：　　④仪检测通道选-：使用荧光量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收🎶设在60℃。具体设置方参照各仪器🍖用说明书。　⑤结果分阈值设定：用荧光定量PCR检测仪进行结果分析，基线取3-10或6-15个循环的荧光信号，阈设定原则为,-值线刚好超正常阴性对扩增曲线最📎点，也可根🧟‍♀️仪器噪音情调整阈值。🧿　(3)核酸检测结果判　　①Real-timePCR反应系统的质量控🏳️：反应结果同时符合以2个条件，否则试验结果效，应重新展检测。阴🍌对照无扩增为阴性。阳对照未出现性结果。　②结果判定🎿　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳和处于灰区标本应重复测或经序列析进行确诊需注意：当本仅为咽拭或血清、血，且检测结☮️为阴性时，结合临床症，慎重做出📿性诊断。　(4)表格记录　　做好光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核🍻原始记录。📳　五、猴痘毒全基因组序　　1.测序标本选取则。本土疫中的首发或期病例、与期病例有流病学关联的🤠键病例、感来源不明的🚭土病例、境输入病例阳标本等。以标本在核酸光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单🦸‍♀️确定开展猴🐄病毒全基因👫🏽测序的机构建议使用扩子技术进行🦸‍♂️痘病毒全基🚡组测序。测-,数据经质控格后方可用后续生物信️分析。二代序平台覆盖度应不低于10×，三代测序平台覆盖⚗️度应不低于50×，全基因组测序覆盖应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。　　各省应建本省输入、土病例猴痘毒基因组数库，应具备列对比分析力。具备测条件的省份在接收标本48小时内开展测序工作关键样本要实验室收到本后1周内提供测序结果告，所有测🦸‍♂️原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进🧕序列汇总、析。病毒病应将序列分结果及时反各省，并将👫🏻国猴痘病毒列汇总、分结果及时上国家疾控局　　3.分子分型。推荐用在线分析具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行-子分型。　附件：　　7-1猴痘病毒检测标本送表　　7-2猴痘病毒标序列测定结🏪报告单【编-:孙静波】

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