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  中新🥻7月27日电据国家控局官方信消息,🚞进一步做👩‍🏫猴痘防控👐作,及时效应对猴🕵️疫情,提猴痘防控🍜作的科学、精准性有效性,实维护人群众生命全和身体康,国家控局会同家卫生健委制定并7月26日印发《猴防控方案。其中提♠️,2023年6月以来,我国多-省份先后告多例猴病例,引新增本土发疫情和匿传播的险较高。🕹️坚持“预为主、防⚜️结合、精防控、快🙋‍♂️处置”原👩‍⚕️,落实“发现、早🐚告、早隔📪、早治疗措施。 《猴痘防方案》全如下:猴防控方案 猴痘是☹️猴痘病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致一种人兽患病。2022年9月,我国报🍑首例猴痘入病例。2023年6月以来,国多个省先后报告例猴痘病,引发新📝本土续发🖊️情和隐匿🆒播的风险高。为指⚾各地科学准做好猴防控工作切实维护👮‍♀️民群众身👨健康,制本方案。、总体要🕐  坚持预防为主防治结合➕精准防控快速处置原则,落“早发现🧊早报告、🌬️隔离、早疗”措施开展医疗🛺构、重点群、入境👏员和重点所等多渠监测。加⏫疫情分析’风险研判有针对性开展重点群健康教🉐和综合干。落实病隔离治疗🛫流行病学查和密切触者追踪理等措施坚持发现起、控制起,及时断疫情传。二、疾特征  (一)病原学特征。 猴痘病毒于痘病毒,-正痘病毒,为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发🐹该病毒。1970年在刚果民主和国一名🐱似天花患的标本中-,次分离到痘病毒,首例确诊人类猴痘例。  🛐痘病毒分🧵两个进化🏃支:(1)分支I,曾称为中非支或刚果🦎地分支;(2)分支II,曾称为西非分支🕥进一步分🗂️IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现多亚分支👩‍🦲包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告👩🏿‍🤝‍👩🏻例输入性痘病例以,各地报中国疾控🦒心病毒病的毒株序均属于IIb分支。  猴痘病耐干燥和温,在痂、土壤和🏳️物、床上✅品等物体面可生存月。该病对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸常用消毒及紫外线有效灭活毒,对过化氢、次酸钠、戊醛、邻苯甲醛等敏🖼️。  (二)流行病学特征。 1.传染源。猴痘病的宿主尚明确,目认为非洲齿类动物(非洲松鼠树松鼠、比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自🎽宿主。传️⃣源包括猴病例及感的啮齿类物、猴和等灵长类物。  2.传播途径。猴痘病主要经黏👯‍♂️和破损皮,侵入人体主要通过🍎接接触病的病变皮或黏膜传,亦可通🗳️接触被病污染的物、长时间,距离吸入例呼吸道🕖沫传播,🧎触感染动的呼吸道泌物、病渗出物、-液及其它液,或被🗄️染动物咬、抓伤感传播。 3.易感人群。人群遍易感。🗺️种过天花苗对猴痘毒存在一程度的交👩🏾‍🤝‍👨🏽保护力。 4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中和西非地🏈呈地方性行,主要过接触感动物传播所引发的传人疫情播链较短🍕主要为儿及青壮年散发病例聚集性疫,通过家或旅行方偶尔播散其他国家地区。2022年5月以来全球国暴发的🦒情主要在💲男性行为📒群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发性行为的性)中经性接触传播大部分病为青壮年👩🏿‍🤝‍👨🏽性,通过型聚会以后续在社💂‍♀️的MSM扩散,并传👨‍🦲至全球多🦆国家和地。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出症状后至👨‍🎨疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性🪂有调查提一些病例能在出现状前1-4天存在传性。  3.早期症状:可出现热、头痛背痛、肌🚶和淋巴结🥻大等。 4.皮疹和黏膜疹:常在热退出现,有病例可出在全身症之前。皮🥿发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂🏋️痂皮脱落🗨️个阶段,同形态皮可同时存📚,可伴有🚣显痒感和⛅痛。可累口腔咽喉🏣膜、肛门🏾生殖器、膜和角膜。痂皮脱后可遗留斑或色素着甚至瘢,瘢痕持时间可长,,,数年。 5.病程及严重程度😐猴痘病程🚣‍♀️2—4周,免疫力低患者的病可能较长猴痘为自性疾病,多数病例状会自行失,也有🌈症和死亡生,主要👨‍🦳儿童、孕和免疫力,-下人群。 2022年以来全多国猴痘👨‍👩‍👧‍👧发疫情中🚱大多数病临床表现轻,部分例无全身状,皮疹限于生殖、肛门直👴黏膜部位死亡病例🏕️要为未得治疗的艾病病毒感者等免疫低下人群🥳2022年以来全球地方性流区病例的死率约为0.1%。三、宣传教🆗与干预 🐢针对重点群、出入人员和一人群等不人群分类展宣传教,有针对⛽地加强不人群的自防范意识🎿个人防护🍬施,积极合做好防工作。 (一)重点人群。各🟣卫生健康疾控部门🎛️合相关社组织,充借鉴艾滋🎈防治综合预经验和务模式,😬MSM经常出入的酒、会所、,池等重点‼️动场所,🧑🏿‍🤝‍🧑🏽展同伴教👤。借助大媒体、MSM社交网站等互联网台,开展痘防控知宣传教育🌫️提高重点群防范意,减少高行为,引🔡有可疑接🙉史者自觉好自我健监测,增主动就诊识。  🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿点人群宣🗳️干预要求见附件1《重点人群👨‍👩‍👧‍👦传干预指》。  (二)出入境人员。通发放宣传🔲料等形式加强出入人员猴痘控知识宣🌇教育。提出境人员注目的地家和地区痘疫情信,不接触🎳痘样症状🍖及啮齿类灵长类等物。提醒自猴痘疫报告国家地区的人’,如在境有可疑接史,入境21天内应做好自我📉康监测,免与他人👭🏾生密切接,一旦出发热、皮、淋巴结📑大等猴痘🥪症状,应👩🏿‍🤝‍👨🏾动就诊并实报告流病学史。🗺️ (三)一般人群。地充分发🏵️新媒体以广播、电、报纸等统媒体作🐻,开展猴防控知识传教育,高公众科防范意识四、疫情测和报告 (一)监测病例定。  1.猴痘样症者。不明因急性皮-(面部或口腔黏膜、肢、生殖或会阴、周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿大者  2.疑似病例。痘样症状,发病前21天内具备以下流行学史中的📒何一项:(1)有猴痘病例报告😤区旅居史(2)有猴痘确诊病或疑似病接触史;(3)有同性性行为,性伴有同🔑性行为史🛠️(4)有地方性流行可疑动物👪触史。 🎢3.确诊病例。猴痘🌊症状者、似病例及切接触者经实验室🅾️测猴痘病核酸阳性💕病毒分离性者。 -(二)多渠道监测。🍍 1.医疗机构监测🗨️各级各类✴️疗机构要展猴痘样状监测,-其是皮肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿询检测门🛫等要重点注猴痘样状者。发猴痘样症🆘者,应主询问流行😘学史,记患者现住😲及联系方,采集标🐴送疾控机进行猴痘酸检测。备猴痘病🐆检测能力猴痘病毒🥛验活动资📅的医疗机也可开展测。  2.重点人群监测。各各类医疗构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨服务时,主动询问否有猴痘❓症状及其〽️疑接触史如发现猴📂样症状者疑似病例◽应及时采标本进行痘病毒核检测。 3.入境人员监测。关收到猴☁️相关异常🍞康申报或疫发现有-,痘样症状入境人员应及时进🥓标本采集核酸检测并发放《诊方便卡,要求其🧀快就诊;于核酸检阳性者,相关信息🩲报辖区疾👨‍💼机构,由💗关部门进步调查处。  4.重点场所👨‍✈️水监测。条件的地可根据当疫情形势🖌️经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴等重点活场所开展🎛️水监测。 (三)病例报告。 相关医机构根据床表现、行病学和验室检测果,及时🙋‍♀️患者进行断。  断的疑似例和确诊例应于24小时内通👨🏿‍🤝‍👨🏼中国疾病防控制信-系统的监报告管理块进行网直报。如境外输入例需填写入来源国或地区。具备网络报条件的疗卫生机,需在规🪂时限内将染病报告信息报告地乡镇卫院、社区♓生服务中或县级疾机构进行络报告,时传真或送传染病告卡至代单位。负🏾病例网络报的医疗生机构,根据实验检测结果🔡流调进展🥿时对病例息进行复🦸、订正。🎃 各县(市、区)出现首例猴痘诊病例或🚁2例及以上存在流行学关联的🦖诊病例,↕️当在2小时内通过突公共卫生件报告管🗒️信息系统👨‍🏭告,事件别选择“分级”。、疫情处🦳  (一)病例管理  各地🌘现猴痘疑病例和确病例应当时转运至疗机构进⌚隔离治疗如临床症◼️明显好转病变部位结痂,可为居家隔治疗,直®️皮疹结痂▫️然脱落,除居家隔。对病情轻且具备家隔离治🦖条件的确病例,经疗机构与控机构联评估后,直接采取👩🏾‍🤝‍👩🏻家隔离治,。对于实居家隔离疗的确诊例发放《,-痘病例居隔离治疗💼康告知书(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住,避免家人有皮或黏膜直接触,做被污染物的消毒,必要不外,确须外时穿长衣裤、佩戴🌽用外科口,避免前人群聚集✅所,避免🧑🏾‍🤝‍🧑🏽其他人有肤或黏膜接接触;定医疗机安排专人责上门或话随访,供健康咨和医疗指。  (二)流行病学调查。 县(市、区)级疾控机构接到辖疑似病例确诊病例✍️告后,及组织开展行病学调,查找感🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿来源,掌、追踪和理密切接🏘️者,分析播链及传🔓特征,及发现潜在风险人群🧛‍♂️其范围、❕征,有针-性地开展👩🏿‍🤝‍👨🏼传教育和合干预。⚔️查过程中挥多部门防联控的同作用,可能获取面准确的🔲调信息。🗼 调查内主要包括例基本信、发病就情况、临表现、转🤾及实验室测;发病21天内与可疑感染源的接触、接触场及接触方👯;发病后隔离治疗的具体活地点、与有皮肤或🌑膜直接接🚲者,以及病前4天内与其有性触者。 猴痘疫情行病学调要求详见,件3《猴痘疫情流行学调查指》。  (三)密切接触者的判🪔和管理。 1.密切接触者定👅。直接接病例的病部位及其污染物品或感染动及其分泌、渗出物污染物;及职业暴或长时间距离吸入-,-例呼吸道沫等,经估有感染险的人员-  2.密切接触者🍧定。根据🌘行病学调及暴露风评估结果🪐疾控机构责及时对🛏️切接触者行判定。 3.密切接触者管。疾控机或基层医卫生机构导密切接👩‍💻者做好自🌵健康监测健康监测限为最后切接触之起21天。  密切触者自我康监测期可正常生与工作,避免与他发生性接🌠等密切接,避免捐血液等;持每天做体温测量🚪症状监测😁出现猴痘症状应及就诊并主报告可疑触史。辖疾控机构基层医疗生机构应密切接触自我健康测第7、14、21天上门或电对其进行🛢️访,提供询指导,现异常情及时进行--置。  切接触者定管理要🦕详见附件4《猴痘密接触者判和管理指🎌》。  (四)消毒与人员防护  做好例衣物、🧞‍♀️巾、床单餐具等个🕊️用品,以可能被病🧑🏽‍🤝‍🧑🏼分泌物、,出物、体等污染的境和物体面的消毒从事病例治护理、行病学调、环境清消毒、标采集和实😋室检测等作人员在作期间做🙇‍♂️个人防护  消毒🕞人员防护求详见附5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个🛠️防护指南🚴‍♂️。六、实室检测 猴痘病毒酸检测首皮肤或黏病变部位🥞本,可同采集口咽👓子标本。🌽省首例猴确诊病例本应送中疾控中心毒病所进复核;本疫情中的发或早期诊病例、早期病例流行病学联的关键诊病例、染来源不的本土确病例、境输入确诊例阳性标🌭等,荧光👈量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因序。所有序原始数、组装序及测序样送检单应获得序列48小时内报送中国疾🏃中心病毒🏺所进行汇、分析。🤖上确诊病📯应至少采一套标本(包括核酸测阳性者🕕皮肤或黏🚏病变标本口咽拭子本以及发急性期和🔏复期双份清)送中国疾控中心毒病所。☂️ 实验室✏️测具体要详见附件7《猴痘病🍂实验室检🥝技术指南👫🏼。七、院感染控制🏟️ 医疗机应当严格🌯好院内感🚣控制。疑病例和确🥥病例应安在隔离病,疑似病🔼单间隔离🤰医务人员行标准预,采取经触传播和飞沫传播病的隔离预防措施⁉️佩戴一次🩺乳胶手套KN95/N95及以上级别的💂‍♂️罩、防护屏或护目、一次性👇离衣等,🕝时做好手生。严格照《医疗构消毒技😀规范》对例的体液血液、排-物、分泌等进行规🥚处理,做诊疗环境(空气、物表面、地’等)、医疗器械、病使用物品的清洁消✂️。根据《疗废物管条例》《🆚疗卫生机🔑医疗废物理办法》-好医疗废🕑的处置和理。八、😃作要求 💐(一)加强组织协调各地卫生康、疾控门加强与关等有关门的密切作和信息享,及时,现与处置痘疫情,实猴痘病发现、疫♿报告、诊隔离、密🤼‍♀️接触者追管理等工,防止疫📬扩散和蔓。各地在痘疫情防过程中应意保护病💱、密切接者和重点群等个人私。  (二)加强宣传引导。🚺地要及时布辖区猴疫情相关息,做好策解读和众健康提。通过多方式和渠开展猴痘控知识宣🦓,加强重人群宣传育的针对和实效性及时回应会关切,⛈️导公众科🍿认识猴痘🥋  (三)加强人员🦓训。各地👮加强对各🧞‍♂️疾控机构医疗机构业人员的训。对医🥫人员重点展猴痘病的识别与断、病例现与报告病例管理相关知识,训,强化治意识。疾控人员点开展流↪️病学调查👧密切接触🧨的判定和理、实验检测、重人群宣传🗻预等相关识培训,⚔️高猴痘疫防控和应处置能力  附件  1.重点人群宣干预指南☘️ 2.猴痘病例居家离治疗健告知书 3.猴痘疫情流行病调查指南 4.猴痘密切接触判定和管🏵️指南  5.猴痘消毒技术指南 6.猴痘个人防护南  7.猴痘病毒👎验室检测术指南 💓附件1  重点人群◻️传干预指🈁  2022年5月以来,全球地方性流区发生的🟤痘疫情以男性行为🔚群(MSM)为主。为充分利用♓国艾滋病治综合干服务体系🦹‍♀️开展MSM等重点人宣传干预😝防范猴痘情传播扩,形成常化艾滋病🤘猴痘综合控一体化对机制,定本指南一、实施略  在📭有艾滋病🃏治综合干服务体系🛃础上,综运用行为干预方法手段,通宣传教育促进安全👩‍🔬行为、动🏁检测、外服务、同教育和互📢网干预等🏌️从个体、体和社会多个层面🥂目标人群🙆‍♂️供猴痘综干预服务二、组织🛑施  各医疗机构疾控机构☯️加强重点室和艾滋🌰自愿咨询测门诊工️⃣人员猴痘识培训,重点人群,,供猴痘防知识宣传🕓检测咨询动员、治🌷和关怀等🤾‍♀️务。各级控机构应积极推动👩🏿‍🤝‍👨🏽地有能力🤯具有良好滋病防治验的MSM志愿者或会组织共参与猴痘,-治宣传工🚕,在工作⏭️程中注意护重点人个人隐私三、形势🕕析  各要加强对点人群猴疫情、防现状、影因素及出境情况的查,及时🗿析研判猴👩‍👩‍👧疫情形势为制定本高危行为预工作计提供依据具体内容🦠括:1.重点人群基、活动形和特点、动场所、入境的时🔞及地区等2.猴痘知识、态度高危行为🤽‍♂️3.猴痘疫情水平及影响因素4.猴痘防治政策及❗业机构已展的工作5.包括志愿者在内有关组织个人已开-,的干预活;6.影响猴痘防治🥥作的困难问题。四宣传干预 (一)宣传教育。级疾控机🧵或健康教专业机构供技术支,社会组😪参与,共研究制定☑️合当地特🤒的猴痘预宣传材料加强警示🏤传教育。过大众媒、MSM网站和以移终端为载的交友软等平台,传国际、内及本地痘疫情信和防控知,提高重⚽人群猴痘范意识。 (二)同伴教育。级疾控机要加强同🩰教育员挑、招募和训,组织支持同伴传活动,♓强人群猴🔦风险防范识,推动👭🏿动检测。🧍‍♀️期组织同教育员工🆔例会,了🚀猴痘干预作存在的🤩难和问题有针对性🛕给予帮助支持。 (三)外展服务。各疾控机构👞预工作人🚃定期到重人群活动🔓所开展猴宣传、咨🤞、发放宣材料等外🚴服务活动提高重点群猴痘防-,意识和知水平,推重点人群强自我健管理,主寻求检测询服务。 (四)检测咨询。级疾控机🎠通过互联、同伴教、外展活等多种形🍛动员有猴样症状或疑接触史重点人群行猴痘检。各级各医疗机构🏡肤(性病)科、肛肠、艾滋病愿咨询检👳‍♀️门诊发现⛵痘样症状,应主动问其流行学史及性触史,记患者现住及联系方,采集标送疾控机进行猴痘酸检测,备猴痘检能力及猴🛌病毒实验-动资质的👨‍⚖️疗机构也开展检测对于已建互联网+HIV检测平台的地区可增加猴检测内容实现互联🤗在线检测🧑🏽‍🤝‍🧑🏼约和结果询。五、点场所干🚁  重点动场所包实体和虚两类场所实体场所括酒吧、🚙所、浴池🧎‍♂️经营性场,虚拟场🙎包括移动联网和社媒体。 🗒️(一)实体场所干预  各级☦️控机构负✝️组织干预🏎️作人员在地MSM经常出入的吧、会所🙎‍♂️浴池等活场所,开猴痘预防🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿预宣传,要包括:☃️ 1.在MSM经常出入的酒吧➕会所、浴等实体场👩🏽‍🤝‍👨🏻,张贴醒的健康教宣传图片-设置健康育资料公栏;  2.强化个人健康责任识,开展痘健康咨,推动开自我风险估;  3.提供转介服务信息告知明确诊疗流程及相关检、医疗机🍏名称、联👴人等信息  各地加强对猴确诊病例病前21天内活动过场所以及🥻水监测阳,,,场所的干宣传,重🗒️目标人群个人隐私护,加强社会组织-,伴教育员痘防治知培训,建🌻规范的行干预流程提高自我护技能。, (二)虚拟场所干。  各疾控机构责组织指🎩当地有序🦥展猴痘线😜宣传,在关网站、交媒体平及时发布更新猴痘🎌传教育内,形成面-重点人群🥢猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务🍖系。  级疾控机支持社会织或同伴育员利用站、信箱🙂社交媒体🚛台,组织展在线咨和交流。时解答网提出的各猴痘相关👨🏽‍🤝‍👨🏻题。针对⏮️同时期猴传播特点定期或不🤼‍♀️期组织专、专业人、同伴教员利用互网和社交体平台进在线宣教各级疾控🏄构要定期导更新相-专业信息,确保宣传容科学、效。  ☯️件2  附件3  猴痘疫情流病学调查👻南  为导各地疾📁机构规范展猴痘疑️病例、确病例和聚🗞️性疫情的🦗行病学调,及时掌病例暴露、接触史🍣流行病学关信息,实密切接者的追踪定,防止🪔情传播扩,制定本💿南。一、👧查目的 (一)查找感染来源掌握、追和管理密接触者。 (二)分析传播链💅传播特征  (三)及时发现🛏️在的风险群及其特、范围,针对性地展宣传教和综合干。二、调对象  🪂似病例、诊病例和集性疫情-三、调查法和内容 通过查资料,询病例、诊🤑医生、家和知情人进行流行🕖学调查。病例的病允许,调时应先调病例本人🏽再对其诊医生、家和知情者🕒行调查。 开展个调查时,认真、详了解和记🌯病例基本息、发病诊情况、床表现、归及实验检测信息发病前21天内与可感染来源接触史、触场所及触方式;病后至隔治疗前的体活动地、与其有肤或黏膜接接触者以及发病-4天内与其有性接触👨‍🦱。  (一)基本情况。如姓名性别、年🤙、住址、籍、联系🦧式等。 📎(二)发病就诊情况临床表现实验室检、发病就️⃣经过和病变化与转🕵️。  (三)感染来源调查。对🌾例发病前21天内的暴露史开展查,包括内外猴痘例报告地🙇‍♀️旅行史或住史,对🛀疑的感染🙇源要详细-问接触时、方式、次、地点👇接触时采👩‍💼的防护措等,特别🏰性接触史调查时,⚾发现调查中未列入🚌但具备重🏢流行病学义的内容应进行详询问和记🟣。  (四)密切接触者调查及定。对病传染期的动情况和🥥群接触情进行追踪排查后,定其密切触者。密接触者判和管理按《猴痘密🦖接触者判和管理指》(附件4)执行。  详见附3-1《猴痘病例个调查表》四、组织实施  照“属地管理”原🗃️,由病例住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖疾控机构展猴痘病💷的流行病调查,就📊医疗机构🛸供诊疗信💺。调查单应根据调😪计划和调📖目的,确调查人员🧚成和职责🪓工,及时👨‍🦽展病例流病学个案🧊查。调查👨‍🦯程中发挥部门联防🖌️控的协同用,尽可获取全面确的流调息。调查间,调查员要做好人防护。、信息的报与分析 疾控机👨‍👩‍👧‍👦完成调查,应做好例分析总,及时将🕰️行病学个调查表、查报告等料逐级报上级疾控构,并做调查资料保管和存。病例流信息要按⚾关规定,格做好信安全和个隐私信息-护。  🚛件:3-1.猴痘病例个案调查🌷  附件4  猴痘切接触者定和管理南  为导各地做猴痘密切触者判定管理,有控制猴痘情的传播👮‍♀️制定本指🛫。一、密接触者判标准  🌳切接触者👩‍👦指直接接👬🏿病例的病部位及其🖊️污染物品🍟或感染动及其分泌-、渗出物🎖️污染物的员;以及业暴露或时间近距吸入病例吸道飞沫,经评估感染风险人员。具情形包括  1.与疑似病例确诊病例病后有皮🔠或黏膜直接触的人,接触方📤包括性接、抚摸、抱和亲吻🍤;  2.与有皮疹状的疑似例或确诊例共用衣🏟️、被褥、具等物品🕸️人员; 3.医疗诊疗、采样实验室检等操作过中可能暴于病毒,评估有感风险的医卫生工作🈁员;  4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性触,并经👓行病学调专业人员🚱估有感染🗑️险的人员--亦可判定密切接触;  5.在狭小密空间与疑病例或确病例长时近距离接🐫(如长时间共处同一📺闭空间),经流行病调查专业员评估有染风险的👩🏾‍🤝‍👩🏽员,亦可定为密切触者; 6.接触感染猴痘病的动物及💼分泌物、出物等污🐕‍🦺物,而未取有效个🤡防护的人🤎;  7.其他可能在病毒暴风险的人。二、密接触者管  1.管理期限与📦式。病例现地疾控构或密切触者所在🔌疾控机构🥞于追踪到切接触者天及时开猴痘病毒酸检测,知并指导💽切接触者好自我健监测,健监测期限自最后密接触之日🌡️起21天。自我健康♓测期间可常生活与👃作,需避与他人发性接触等切接触,免捐献血等。  2.知情告知。实施健监测时,控机构或-,层医疗卫✔️机构应口告知健康🚱测的缘由期限、注事项和疾相关知识👩🏻‍🤝‍👨🏽以及负责访疾控机🎠或基层医卫生机构系人和联方式,并放《猴痘🚊切接触者,,,康告知书🖲️。  3.定期随访疾控机构👨🏿‍🤝‍👨🏼基层医疗生机构应第7、14、21天电话或上门动询问密接触者自健康监测💭况,提供询指导建。发现异情况,及调查处置  4.自我健康监🏒。坚持每做好体温量和症状测,主要状包括发,-(>37.3℃)、皮疹、浅表🔨巴结肿大。密切接者一旦出🥼相关症状及时前往疗机构就或与随访系人取得系,接受🟡痘病毒核检测。 附件:4-1.猴痘密切接触者🛶康告知书🎞️ 附件5  猴痘消⁉️技术指南📎 为进一规范猴痘情相关的毒工作,实科学消😙、精准消🥍,减少猴病毒对公健康造成危害,制🤽‍♂️本指南。💽、疫源地毒  (一)适用范围。  适于出现猴病例后,其可能污的场所和品进行的时消毒和🏌️‍♀️末消毒。✂️ (二)消毒原则。😹 1.范围和对象确。  根🏍️流行病学查结果,定现场消的范围和象。对病在住院、🦈运期间可污染的环和物品,行随时消。对病例住或活动的场所,居住场所工作场所🏋️‍♀️学习场所诊疗场所转运工具👩‍❤️‍👩及其他可受到污染场所,在离开后(如住院、转、出院、亡)进行终末消毒。 2.方法选择。 (1)诊疗用品消毒🏴‍☠️尽量选择❓次性诊疗品,非一💜性诊疗用应首选压🚞蒸汽灭菌不耐热物可选择化🍝消毒剂或温灭菌设进行消毒🚁灭菌。 (2)手消毒。建议用手消毒揉搓双手行消毒,可选择75%乙醇、过氧化氢等🙎毒剂。 🎬(3)环境和物体表👬🏼消毒。可择含氯消-剂、二氧氯、过氧酸、过氧🤞氢等消毒擦拭、喷🔎或浸泡消。  (4)衣物、床单等纺织消毒。可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂--泡等消毒👨‍🦲式。  (三)常见污染对象的👫🏿毒方法。 1.手消毒。  选用速干-,-消毒剂,直接选用75%乙醇进行擦拭消🧙‍♂️;醇类过者,可选季铵盐类🐻有效的非类手消毒。有肉眼见污染物,应先使洗手液(或肥皂)在流动水下按六步洗手清洗双手🔇然后按上方法消毒🦇  2.皮肤、黏膜  皮肤污染物污时,应立清除污染,再用一性吸水材🦿沾取0.5%碘伏或过氧化氢消👔剂擦拭消3分钟以上,使用清清洗干净粘膜应用☠️量生理盐🔍冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒  3.床单、毛巾🌱衣服等纺品。  例使用的单、毛巾🕊️衣服等纺🔒品,无肉可见污染时,若需复使用,用流通蒸或煮沸消30分钟;或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后,按常规清洗-或用其他效的消毒🤾法。不耐🎩的衣物可用环氧乙或干热方进行消毒👙理。  分泌物、出液、排🪑物、血液体液等污物时,建按医疗废📤集中处理🤼‍♀️  4.餐(饮)具。  病例使用的碗🔈盘、筷、等餐(饮)具清除食残渣后,沸消毒30分钟,或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再用清水净。  5.污染物。  对病分泌物、出液、排物、血液,体液等少污染物可一次性吸材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消🧗剂(或能达到高水平毒的消毒巾/干巾)小心移除  对病分泌物、出液、排物、血液体液等大污染物应用含吸水分的消毒或漂白粉全覆盖,用一次性水材料完覆盖后用🧅量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒🏦浇在吸水料上,作🥬30分钟以上(或能达到高水平毒的消毒🙇‍♂️巾),小心清除干净清除过程🐳避免接触🍂染物,清的污染物🍍医疗废物中处置。📶 病例的泌物等应专门容器☠️集,用有👨‍👦‍👦氯20000mg/L的含氯消剂,按物药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污😗物后,应污染的环和物体表进行消毒盛放污染的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然,清洗干净  6.地面、墙壁  有肉可见污染时,应先全清除污物再消毒无肉眼可✉️污染物时🙏可用有效1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒擦拭或喷消毒;不,腐蚀的地和墙壁,可用2000mg/L的季铵盐消毒剂喷或擦拭;🗃️毒作用时不少于30分钟。 7.物体表面。  疗设施设🧍‍♂️表面以及围栏、床柜、家具📗门把手、生洁具和居用品等肉眼可见染物时,🟩先完全清😓污染物再🦹‍♀️毒。无肉🍺可见污染时,用有氯1000mg/L的含氯消毒🔂或500mg/L的二氧化氯消剂,不耐💖蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒进行喷洒🗂️擦拭或浸消毒,作30分钟后清水擦拭净。  8.污水和粪便。  🐓进入市政水管网前进行消毒,理,消毒污水应当合《医疗构水污染🈳排放标准(GB18466-2005)。  9.病例生活垃。  病🖲️生活垃圾医疗废物理。  10.医疗废物。  疗废物的置应遵循医疗废物理条例》《医疗卫机构医疗物管理办♑》的要求规范使用层黄色医🧚‍♂️废物收集封装后,😩常规流程行处置。 11.室内空气。 如经科评估,需室内空气行消毒,在无人情下,可选,-5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢二氧化氯(浓度按产说明书)等消毒剂,20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒也可采用验证安全效的其他毒方法。、注意事  现场毒应确保😼用消毒产🥐合法有效所选消毒法科学可。现场消时,根据场情况和🔓关标准要-,选择合有效的个🤤防护装备在做好个防护的前下,严格照工作方🔴实施消毒  消毒施单位应备现场消能力,操人员应经消毒专业训,掌握毒和个人⬜护基本知,熟悉消器械的使👨🏾‍🤝‍👨🏽和消毒剂配制等。🏔️ 每次开消毒工作均应做好💪毒记录,💸括消毒对、消毒面🍉(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。🦓时,相关⬇️门和单位做好消毒作的监督👫🏽理和评价🧽  附件6  猴痘人防护指🔜  为加公众、疫🖕处置相关作人员和🦟务人员的人防护,免猴痘病暴露感染制定本指。一、居隔离治疗病例等相📍人员  (一)适用范围。  用于居家离治疗的🌺例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共居住者的人防护。 (二)居家隔离区要求。 1.应选择有自然通、独立卫间的房间为隔离区。  2.应配备专的餐具,单、毛巾👨床上用品消毒剂和🦏罩等个人🈷️护用品,视和平板脑等电子备。  3.卫生间宜配备专用洗衣机,漏应有水。  (三)病例管理要求。 1.应能够进行自我护。  2.应每天做好体温测和症状监,避免与人共用个🐊物品。 ⚓3.避免与他人发生接触,避◻️与免疫力下人员、👨🏿‍🤝‍👨🏽童、老人🗯️孕妇及其人员的直接触,避🤩与宠物等物接触,免捐献血等。  4.外出就诊时,应佩医用外科罩,着长长裤,确👗遮住所有伤皮肤,🧗免与他人切接触,💣免乘坐公交通工具👩‍🌾  (四)照护人员🌠求。  1.应每天做好体温测和症状监👩‍⚖️。  2.应尽量避进入隔离👴域。如需入隔离区,应佩戴用外科口和一次性套,与病保持至少1米的距离在离开隔区域之后🚇应加强手生,并对下的口罩🎅手套进行毒处理后🍦弃。  3.在拿放和清洗居家离治疗病的床单、服和处理😹圾的过程,应避免😖动。用湿布拖地,免干扫。湿抹布清🤼家居用品面,地毯用蒸汽清,避免使🙄吸尘器。👫🏽 4.应将居家隔离疗病例的🗺️具、床单毛巾和衣单独洗涤消毒,可择热力消、含氯消剂或季铵🐋类消毒剂👔泡等消毒🗂️式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同居者出现任症状或不表现,应-及时前往定医疗机就诊并主报告可疑🦥触史。 😊2.对其接触的物品活动的区,-等结合风评估结果📷行消毒处-。二、疫🟤处置相关作人员 (一)适用范围。 👾适用于猴疫情期间🌕行病学调、环境清消毒人员个人防护  (二)流行病学查人员防-,要求。 1.个人防护装备。次性乳胶套、医用🌡️科口罩、👩‍❤️‍👨次性隔离🌻等。  2.个人防护要求。规佩戴口罩加强手卫,与被调👳‍♀️人员保持少1米的距离。  3.废物管理。调查结后,废弃个人防护备暂存、🌅理和处置按照《医⏰废物管理例》执行  4.应急处置。在调查过中出现口脱落、直接触了病皮肤或分物等情况-,要结合被查人员的床诊断结,,,、空间的闭性、接🐠的时间和-离等进行险评估,合风险评🌅结果,采相应的处措施。 (三)环境清洁消毒员防护要🍨。  1.个人防护备。一次乳胶手套医用外科罩、一次隔离衣、🧝水靴套等  2.个人防护要。规范佩口罩,加🏭手卫生,量减少与消毒物品直接接触👨‍🎓  3.废物管理。洁消毒结后,废弃个人防护备暂存、📣理和处置按照《医废物管理💜例》执行  4.应急处置。🎌在清洁消🛋️过程中出口罩脱落皮肤损伤直接接触🌜泄物、血等情况,结合被清消毒物品类型、接🍜的时间和间的密闭等进行风评估,结🗳️风险评估↩️果,采取应的处置施。三、务人员的人防护 (一)适用范围。 🤵适用于猴疫情期间务人员及工作环境防护。 (二)基本要求。 1.个人防护装备要。医务人📦执行标准防,采取,-接触传播经飞沫传疾病的隔与预防措🐳,佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别🚪口罩、防面屏或护镜、一次🚔隔离衣等🧹  2.环境防护要。医院环的清洁消应符合附5的要求。应避免干🧔尘、清扫吸尘等活。首选湿清洁方法  3.废物管理。👫🏿人防护装、病例敷等暂存、理和处置™️按照《医废物管理例》执行🐪  附件7  猴痘毒实验室测技术指  为指各级疾控门和其他关机构规开展猴痘毒实验室测工作,速、准确👰别猴痘确病例,制本指南。指南主要绍标本采以及猴痘毒核酸荧定量PCR检测方法生物安全求等内容一、检测象  (一)猴痘确诊病例和疑病例; 🥘(二)密切接触者;🚯 (三)感染或疑似染猴痘病的动物;💒 (四)环境或其它物材料。、技术人基本要求 (一)采样人员。事猴痘病核酸检测本采集的术人员应🌵经过生物全培训,🧚训合格后🥰可从事采工作。采👨‍🦲人员应熟💩采集标本类和采集法,熟练握标本采🏓操作流程注意事项✳️做好标本息记录,保标本质符合要求标本及相信息可追。  1.采样人员👩‍❤️‍💋‍👨人防护装📉要求:KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏护目镜、次性隔离、一次性胶手套(尽可能戴两)、靴套;如果接触病例血液体液、分💋物或排泄-,应及时换手套。水采样人可根据实工作需要适当降低护级别。 2.住院病例的标由所在医医护人员🧉集,根据验室检测💲作的需要🧑‍🤝‍🧑可结合病🔔多次采样  3.密切接触者本由当地🧂控机构或疗机构专🧍‍♀️人员采集🗾  4.感染或疑似染猴痘病🔋的动物由🅱️地疾控机协调动物控部门专👨‍🦼采样人员责采集。👈 5.环境或其它生材料标本-相关专业🚈样人员负采集。 (二)检测人员。实室检测技🥓人员应具🦖相关专业专以上学-或具有中及以上专🐺技术资格并有2年以上实验室作经历,🤷‍♂️受过核酸测相关培,培训合后方可从检测工作🚬实验室配的工作人数量应与开展检测目及标本相适宜,保能够及、熟练、🗾确地开展验室检测报告结果三、标本集、保存🎎运输  (一)标本采集种类。👬🏽 1.首选标本是皮😼(黏膜)病变部位标,包括病表面拭子痘疱液或🦢疱渗出物子、痘痂痘痂拭子。  2.呼吸道标,如口咽子,可用病例急性检测,也密切接触🆕检测最常📻标本。 3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本行核酸检♑。  4.采集发病-,-7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用抗体检测  5.直肠拭子、液、精液唾液等其,标本仅用研究,根工作需要集。  6.污水或其它环境生材料标本👏据实际工需要进行集。  (二)标本采集要求。 采集皮(黏膜)病变部位标时应使用菌聚酯纤🤯、尼龙或👑似材质拭,避免使棉拭子。集疑似病👩🏼‍🤝‍👨🏿的标本前避免使用75%乙醇等消毒剂清病变部位每种类型皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭,每个病应同时采🙇‍♀️身体不同位或外观同的2-3种病变标。采集皮🐯(黏膜)病变部位标时应适当🕋力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物不同拭子™️本应放置不同的采🤛管中。进病毒分离-应采集干子标本(无采样液)或以非灭活病毒采样保存。根👩‍👩‍👦实验室活资质确定,用非灭活或灭活型样液采集本。  (三)标本采集方法。 1.斑疹、丘疹、疱或脓疱🚔皮肤(黏膜)病变部位标本:一紧握采样子尾部,与拭子头保持一寸上距离。👩‍🚀样时适当🙎力下压拭,在皮损面来回擦🟪至少2-3次,然后拭子另一再重复擦2-3次。如果在擦️⃣过程中痘破裂,要保采集到疱液。采后将拭子💆‍♂️置于无菌样管中(可含病毒采液或不含体),折断拭子头,除拭子尾,盖上管,以消毒巾擦拭消🧠采样管,封口膜密-管盖后将样管保存送检。 2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前’确保实验可检测此标本。使无菌镊子♣️其他钝头🐛械夹取全痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮🚕放置于干、无菌的🎿样管中,样完成后创可贴覆患处。 📯3.口咽拭子标本:🏳️‍🌈采集人员部微仰,张大,露两侧扁桃,将拭子过舌根,被采集者侧扁桃体🔍微用力来擦拭至少3次,然后在咽后壁下擦拭至3次,将拭子头浸入2-3mL病毒保存的管中或🈶于不含液,-(干拭子)的无菌管,尾部弃,旋紧管。  4.血液标本尽量采集性期(发病7天内)的血液标本❔建议使用EDTA抗凝剂的真👱‍♀️采血管采5mL全血,可利用血进行检🤫,或室温置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血于无菌管进行检测👭🏼  5.血清标本:🦏真空负压🩹血管采集液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清无菌螺口料管中。一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份清应在发🌆后第3-4周采集,集血液标😥5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集清于无菌🛏️口塑料管,用于猴▫️抗体检测-  6.其他标本:据设计需规范采集  (四)标本保存#️⃣  标本🧰在收集后1小时内冷(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行测。可在1周内检测标本可置4℃环境中保存;1周内无法检--的标本,期可置于-20℃环境中保存,期应置于-70℃或以下环境中存。全血离血浆前藏(2-8℃),分离出的血浆于-20℃或以下环中保存。⛎设立专库👩‍❤️‍💋‍👩专柜单独存标本,🛐免反复冻👮‍♂️标本。 🌿猴痘病毒其相关标应由专人理,准确🖍️录病毒及本的来源🧝编号、数等信息,体要求可考《病原🐕生物菌(毒)种保藏数据描述通》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒标本安全🕹️严防发生用、恶意♑用、被盗被抢、丢🐟、泄露等件。  (五)标本送检。  本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验🚨,如需长运输标本应采用干冷冻运输👲式进行保🧛‍♀️。  1.送检标本🧖病例标本由省级及下疾控机️⃣进行初步测,各省例猴痘阳标本应送国疾控中病毒病所核。每个性病例至采集一套本(皮肤或黏膜病变位标本、咽拭子标🦍及急性期恢复期双血清标本)送中国疾中心病毒所检测。省级疾控构根据实情况制定内样本送、复核流。  2.病原体及本运输:🚸 (1)国内运输。痘病毒或🗼他潜在感性生物材的运输包分类属于A类,对应联合国编为UN2814,包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安运输技术则》的PI602分类包装要求通过其他🌜通工具运的可参照上标准包。猴痘病🤭或其他潜感染性材运输应按《可感染类的高致性病原微,物菌(毒)种或样本-输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物本运输标执行。 (2)国际运输。猴🎗️毒株或样在国际间输的,应范包装,Ⓜ️照《出入特殊物品生检疫管规定》办相关手续并满足相国家和国相关要求四、猴痘毒核酸检要求及流  (一)实验室资要求。 ⚗️开展猴痘➡️毒核酸检️⃣的实验室应当符合病原微生🕹️实验室生🈂️安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构🥉床基因扩检验实验🚼管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定,具备区的市级👷‍♀️生健康部备案的生🧟‍♀️安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件,并🛠️案猴痘病相关实验🚥动。独立👷‍♂️置的医学验实验室应符合《👩🏾‍🤝‍👨🏻学检验实室基本标(试行)》《医学检实验室管🧏规范(试行)》等要求。  开猴痘病毒离、培养中和等涉病毒扩增👩‍🔧使用等实操作的实室应具备家卫生健委批准的物安全三⏹️(BSL-3)实验室及以上实室条件,🐡获得猴痘毒实验活批准。分的猴痘病应送国家原微生物👨‍🦲藏中心/国家病原微物资源库毒分库保🧘‍♀️。  (二)实验室生物安全要。  根2006年公布实施《人间传的病原微💁物名录》(简称《名》),猴痘病毒生物害分类为一类,是种高致病病毒。按《名录》求,猴痘🌦️毒的分离🎽培养等涉🆑病毒扩增使用的实-操作需在BSL-3及以上实验,-的生物安🎮柜内进行非灭活采🚯液采集的🔦痘病例样⬅️的灭活在BSL-3实验室进行💒样本灭活🏩猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验👩🏿‍🤝‍👩🏾或PCR检测的专门域或房间行。如《录》更新开展猴痘🙄毒操作的验室生物🌝全要求应最新《名🌃》执行。水样本的👫🏻活参照普⛩️生物样本💆‍♀️  (三)实验室分🐇要求。 😵原则上开猴痘病毒酸检测的验室应当置以下区:试剂储🤛和准备区标本制备、扩增和物分析区三个区域物理空间应完全相独立,空🔚应定向流。各区功🈸分别是:🥛 1.试剂储存和准区:贮存剂的制备试剂的分🥢和扩增反混合液的备,以及心管、吸👵等消耗品贮存和准🐴。  2.标本制备📹:转运桶启、标本活,核酸取及加入扩增反应等。  3.扩增和产物分析区🖊️核酸扩增产物分析  根据’用仪器的💪能,区域’适当合并如采用标处理、核提取及扩👩‍👧‍👧检测为一💐的自动化析仪,标制备区、增和产物析区可合。  (四)主要仪器设备。 😛实验室应配备与开检验项目👨‍🏭适宜的仪设备,包🍟:二级生安全柜、速台式离机、干浴温器、荧定量PCR仪、计时、移液器  (五)实验室猴病毒核酸🤸‍♂️测流程。 实验室🌆到标本后按照标准🍗作程序进🚥试剂准备标本前处、核酸提、核酸扩、结果分↙️及报告。验室应当立可疑标和阳性标复检流程  1.试剂与材料  (1)标本:包☹️病变表面子、痘疱🛑或痘疱渗⛓️液拭子、👒痂或痘痂子、咽拭🕶️、全血或浆等标本  (2)核酸提取⁉️剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基🔆组DNA提取试剂盒血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒  (3)核酸检测😃剂:  🔚试剂:DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴病毒检测🙋‍♀️物、探针  ③阳对照:涵😘检测靶标列的质粒  (4)灭菌去离水、无水☦️醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用手部和物表面常规毒,开启有效期为1周。  含氯消毒🥵:现用现,含有效🧴1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒,含效氯5000mg/L的消毒液于感染性🔀料溢洒时👨🏾‍🤝‍👨🏻应急处理  (6)耗材:包带滤芯的头、螺旋的离心管👩‍❤️‍💋‍👨非螺旋口离心管、锆珠的粉管、PCR反应板和明封膜或PCR反应管和透明盖  (7)BSL-2个人防护品:包括KN95/N95口罩及以上级别👯口罩、一性隔离衣防护眼罩🏆面屏、一🎁性帽子、套、靴套手套。 2.实验前的标本接。  (1)核对被检标本编号姓名、性、年龄及🛵测项目;🆔 (2)待检标本的态如有异,需注明  (3)待检标本期存放在-70℃,短期存放可-20℃,避免反复🌌融。  3.核酸检测操作步骤⛲注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行作,具体下:  提取试剂备:第一开启试剂,在使用🚇先在漂洗中加入无😄乙醇,加体积参照上标签。有试剂在用前应平至室温;🏍️有离心步应在室温进行。 🐥②处理样:  A.痘疱液:👩🏾‍🤝‍👨🏻拭子标本以适当体✏️的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。▶️100μL样本,加🧛80μL缓冲液,总为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL;  B.病变皮疹或痂:取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS,研磨或匀浆处理✔️取80μL,然后加100μL缓冲液; C.咽拭子、其它子:从采🧶液中取200μL标本,干拭子🌟本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀后200μL;  D.全血或血:直接取200μL标本。  加入20μL蛋白酶K溶液,混,溶液会清亮。若本为病变🦸‍♂️疹或其它🤩织时,加蛋白酶K混匀后,在56℃放置,直至组织解,再进🚓下一步骤  ④加200μL裂解缓冲,充分混,70℃放置10分钟,或至溶变清亮,短离心以除管盖内水珠。 需注意:入裂解缓-,液后可能🐩出现白色状沉淀,70℃放置后会消失如溶液未清亮,说😅细胞裂解彻底,可导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  ⑤加200μL无水乙醇,↗️分混匀,👭🏼时可能会现絮状沉,简短离👩🏽‍🤝‍👨🏿以去除管内壁水珠  ⑥将一步骤所溶液和絮沉淀均加吸附柱中(吸附柱放废液收集中),8000rpm离心1分钟,弃废液  ⑦加500μL漂洗缓冲1(使用前先检查是已加入无⏺️乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废。  ⑧🎂入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入水乙醇),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。 ⑨将吸附🐛放回废液集管中,-大转速13000rpm离心1分钟,尽量📅除漂洗液  ⑩将➡️附柱转入根干净的🦗心管中(需自行准备试剂盒中提供),加入50μL洗脱缓冲或灭菌去子水,室放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤液,做好🌘记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。  (2)核酸检测:实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体➗的准备:孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检⛹️标本外,🦊加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;所有本,包括照,应设🌠孔。  🧏‍♀️加样:每反应管中入核酸或照各5uL,盖紧管🙅或封好透膜,置于光定量PCR检测仪上。  ③增条件设:  ④📄器检测通选择:使荧光定量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法👏照各仪器用说明书  ⑤结分析阈值定:使用光定量PCR检测仪进行结果分时,基线3-10或6-15个循环的荧信号,阈设定原则阈值线刚超过正常🏰性对照扩曲线最高,也可根仪器噪音🚾况调整阈。  (3)核酸检测结果判断 ①Real-timePCR反应系统的量控制:应结果应🔟时符合以2个条件,否则试验果无效,重新开展🧘测。阴性💄照无扩增🍽️为阴性。性对照未现阴性结📀。  ②🖌️果判定: A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳性处于灰区标本应重⭕检测或经列分析进🦸确诊。需意:当标仅为咽拭或血清、浆,且检结果为阴,-时,应结临床症状🪕慎重做出性诊断。 (4)表格记录 👯‍♀️做好荧光🏈量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记。  五猴痘病毒基因组测🪒  1.测序标本选原则。本🎡疫情中的发或早期例、与早病例有流病学关联关键病例感染来源明的本土例、境外入病例阳⏸️标本等。上标本在酸荧光定,,PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。省为单位定开展猴病毒全基-组测序的,构。建议用扩增子术进行猴-病毒全基*️⃣组测序。🎉序数据经控合格后可用于后生物信息析。二代序平台覆深度应不于10×,三代测序🔲台覆盖深应不低于50×,全基因组测序盖度应不▪️于98%。数据比对🙋析推荐参👩🏻‍🤝‍👨🏾猴痘基因NC_063383.1。  各省应建立⬇️省输入、土病例猴-病毒基因数据库,🗞️具备序列比分析能。具备测🤠条件的省👨🏾‍🤝‍👨🏼要在接收本后48小时内开展序工作,键样本要实验室收标本后1周内提供测结果报告所有测序📄始数据(一般为fastq格式)、组装序(一般为fasta格式)和标本序列测定果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报-中国疾控😧心病毒病进行序列总、分析🅿️病毒病所将序列分结果及时馈各省,👨‍🏫将全国猴病毒序列😞总、分析果及时上🏜️国家疾控。  3.分子分型⛲推荐使用👨‍👨‍👧‍👦线分析工Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株行分子分。  附:  7-1猴痘病毒检测标本检表  7-2猴痘病毒标本序测定结果告单【编:孙静波】
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